Методика проведения иммуногистохимического исследования

Описание

Иммуногистохимическое исследование хронического эндометрита с типированием плазматических клеток (CD-138) — исследование биоптата ткани, меченого антителами, под микроскопом. Анализ выполняется для проведения дифференциальной диагностики хронического эндометрита.
ИГХ-исследования проводят после выполнения гистологического исследования.Иммуногистохимическое исследование  
Вид морфологического исследования тканей, полученных в ходе биопсии, и меченых специфическими антителами. В основе метода лежит принцип взаимодействия «антиген-антитело». Ткань, в которой происходит патологический процесс, экспрессирует антигены. При нанесении на образец ткани антител, образуется комплекс антиген-антитело. Благодаря меткам, он становится доступным для визуализации. Врач-патоморфолог изучает количество клеток, окрашенных маркёром. Он определяет в исследуемой ткани локализацию клеток, гормонов и их рецепторов, ферментов, иммуноглобулинов, компонентов клеток и отдельных генов.Хронический эндометрит
Хронический эндометрит — это клинико-морфологический синдром, при котором возникают функциональные и структурные изменения слизистой полости матки вследствие повреждения клеток эндометрия инфекционным агентом. Хронический эндометрит может протекать без отсутствия клинических признаков. Он часто является причиной нарушения репродуктивной функции, вплоть до бесплодия.
По этиологическому фактору хронический эндометрит бывает специфическим (с выявлением инфекции) или неспецифическим (полимикробной ассоциации).Факторы риска развития хронического эндометрита: 

• Инфекционно-воспалительный процесс в малом тазу.
• Наличие внутриматочной спирали.
• Инфекции влагалища и шейки матки.
• Бактериальный вагиноз.
• Деформации полости матки с нарушением циклического отторжения эндометрия.
• Инвазивные вмешательства в полость матки.
• Лучевая терапия в области органов малого таза.
• Раннее начало половой жизни.
• Курение.
• Употребление алкоголя.

В результате воздействия патологического фактора развивается воспалительная реакция, которая является универсальным способом защиты в организм. Про хроническом эндометрите возникает воспаление в интерстициальной ткани. Оно проявляется инфильтраций макрофагами, лимфоцитами, плазматическими клетками и фиброзом ткани. На местном уровне наблюдается активация цитокинов-медиаторов воспаления. Цитокины способствуют дополнительному привлечению в зону воспаления лимфоцитов, активации нейтрофилов и макрофагов. В результате воспаления наблюдается повреждение эпителия, нарушение его пролиферации и нормальной циклической трансформации.
«Золотой стандарт» в диагностике хронического эндометрита это гистологическое исследование.
Диагноз выставляется врачом-патоморфологом на основании изучения биоптатов эндометрия. Морфологически заболевание проявляется инфильтрацией стромы эндометрия плазматическими клетками.
В настоящее время воспалительные заболевания органов малого таза относят к аутоиммунному процессу, который протекает как самоподдерживающаяся патологическая реакция.
Иммуногистохимическое исследование определяет характер иммунологических нарушений. Анализ выявляет пациенток с аутоиммунным воспалением и аутоиммунным ответом в эндометрии, что определяет тактику их ведения.CD-138
Это маркёр плазматических клеток. Его определение показано при неполной морфологической картине хронического эндометрита.Показания к проведению ИГХ-исследования:

• бесплодие;
• хронический эндометрит;
• воспалительные процессы слизистой полости матки.

Подготовка
Подготовка определяется лечащим врачом.
Диагностическое выскабливание слизистой оболочки матки рекомендовано проводить в среднюю и позднюю фазу пролиферации — на 7–10-й день менструального цикла.
Материалом для исследования являются парафиновый блок и предметные стёкла. В случае если материалом является образец ткани в растворе формалина, дополнительно должна быть выполнена услуга изготовления стёкол.
При проведении гистологического исследования в сторонней лаборатории необходимо предоставить протокол гистологического исследования.
Интерпретация результатов
Ответ выдаётся в виде описания микропрепарата, применяемых красителей и заключения. Заключение может интерпретировать только врач, направивший на проведение исследования.

Что представляет собой лиганд программируемой клеточной гибели PD-L1?

• PD-L1 – трансмембранный белок, лиганд к рецептору PD-1. При связывании с рецептором PD-1 на цитотоксических лимфоцитах блокирует их цитотоксическую активность
• В норме участвует в физиологическом механизме подавления аутоиммунных реакций
• При экспрессии PD-L1 опухолевыми клетками данный лиганд участвует в механизмах ускользания опухоли от иммунного контроля (рис.1)

PD-L1 – лиганд рецептора программируемой клеточной гибели 1 (PD-1). Это трансмембранный белок с молекулярной массой 40 кДа, экспрессируемый на T- и B-лимфоцитах, NK-клетках, дендритных клетках, макрофагах, мезенхимальных стволовых клетках. PD-L1 способен связываться не только с рецептором PD-1, но и обладает сродством к CD80 (B 7.1) – белку, находящемуся на поверхности дендритных клеток, активированных B-клеток и моноцитов, который стимулирует активацию и выживаемость Т-лимфоцитов путем взаимодействия с CD28 на их поверхности. Лиганд PD-L1 способен угнетать этот процесс путем конкурентного связывания с CD80. На рисунке 1 представлены межклеточные взаимодействия (активирующие и ингибирующие сигналы) между Т-лимфоцитом и антигенпрезентирующей клеткой.

Рисунок 1. PD-1/PD-L1 сигнальный каскад в межклеточном взаимодействии иммунокомпетентных клеток. При связывании лиганда PD-L1 (лиганд рецептора программируемой клеточной смерти 1, также называемого PD-1) с рецепторами PD-1 и B7.1, находящимися на Т-лимфоцитах, происходит угнетение цитотоксической активности Т-лимфоцитов.

УРОТЕЛИАЛЬНЫЙ РАК: методы определения экспрессии PD-L1

Стандартом терапии 1 линии пациентов с раком уротелия продолжают быть химиотерапевтические режимы на основе цисплатина . Однако по данным литературы до 50% больных не подходят для назначения данной терапии . Ситуация с лечением изменилась с появлением иммунотерапевтических анти-PD-L1 препаратов . Сейчас для назначения иммунотерапии в первой линии распространенного уротелиального рака пациентам, которые не могут перенести ципсплатин, рекомендовано проведение PD-L1 диагностики. Для остальных групп пациентов диагностика PD-L1 не требуется (при невозможности проведения любой платиносодержащей химиотерапии и у пациентов с прогрессированием заболевания в ходе или после окончания любой платиносодержащей химиотерапии или в течение 12 месяцев после неоадъювантной или адъювантной химиотерапии).

Экспрессия PD-L1 определяется методом иммуногистохимии. Для этих целей используется диагностический набор Ventana PD-L1 (SP142) Assay (Ventana Medical Systems, Inc.). Для тестирования используется ткань опухоли, фиксированная в формалине и залитая в парафиновый блок. PD-L1 статус у пациентов с уротелиальной карциномой определяется как часть площади опухоли, занятая PD-L1 экспрессирующими иммунными клетками, инфильтрирующими опухоль, любой интенсивности окрашивания.

Рисунок 3. Окрашивание опухолевых и иммунокомпетентных клеток, инфильтрирующих опухоль, с помощью ИГХ-анализа VENTANA PD-L1 (SP142).

Рисунок 4. Окрашивание иммунокомпетентных клеток, инфильтрирующих опухоль, с помощью ИГХ-анализа VENTANA PD-L1 (SP142).

Определение уровня экспрессии PD-L1 иммуногистохимическим методом позволяет выделить группу пациентов для назначения анти-PD-L1 терапии.

Описание

Иммуногистохимическое исследование (1 антитело) — комплексное исследование биоптатов для идентификации специфичных антигенных свойств злокачественных опухолей, а также для определения вида и подвида онкозаболевания, его распространённости и первичного очага опухоли.
ИГХ-исследования проводят после выполнения гистологического исследования.Иммуногистохимическое исследование  
Вид морфологического исследования тканей, полученных в ходе биопсии, и меченых специфическими антителами. В основе метода лежит принцип взаимодействия «антиген-антитело». Ткань, в которой происходит патологический процесс, экспрессирует антигены. При нанесении на образец ткани антител, образуется комплекс антиген-антитело. Благодаря меткам, он становится доступным для визуализации. Врач-патоморфолог изучает количество клеток, окрашенных маркёром. Он определяет в исследуемой ткани локализацию клеток, гормонов и их рецепторов, ферментов, иммуноглобулинов,компонентов клеток и отдельных генов.
С помощью иммуногистохимического исследования возможно не только поставить точный диагноз — оно применяется также для определения возможности проведения специфической терапии и для определения степени злокачественности образования. Одной из целей иммуногистохимического исследования в случае метастазов из невыявленного первичного очага является выяснение источника метастазирования. Иммуногистохимическое исследование проводится:

Для определения гистогенеза опухоли, то есть определения конкретного вида опухоли, когда при рутинном гистологическом исследовании возникают сложности или сомнения в правильном диагнозе, а следовательно и в дальнейшей тактике лечения.
Для определения степени злокачественности опухолей, что также крайне важно для лечения пациента.
Для определения степени распространения опухолевого процесса в лимфатических узлах (при микрометастазах, когда при рутинном гистологическом исследовании опухолевой ткани еще может быть «не видно»).
Для разграничения в ряде случаев предраковых и раковых заболеваний.
Для определения таргетной терапии при ряде злокачественных опухолей (то есть лечение пациента может существенно изменяться при разной фенотипической картине одной и той же опухоли).

При каких заболеваниях мы проводим ммуногистохимическое исследование?

• Эпителиальные опухоли пищевода, желудка, кишечника, поджелудочной железы.
• Гастроинтестинальные опухоли.
• Нейроэндокринные опухоли различных локализаций.
• Мягкотканные опухоли различных локализаций.
• Широкий спектр лимфопролиферативных заболеваний.
• Опухоли женских половых органов (яичники, маточные трубы, шейка и тело матки).
• Опухоли кожи.
• Меланомы.
• Опухоли печени.
• Опухолеподобные заболевания и опухоли предстательной железы.
• Опухоли почек.
• Опухоли лёгких.
• Опухоли мочевого пузыря.
• Определение гистогенеза опухоли при неустановленном первичном источнике.

Подготовка
Определяет лечащий врач.Интерпретация результатов
В заключении врач отмечает, к каким антителам определена сродство ткани. Дополнительно описывается морфологическая структура образца — какие клетки и в каком количестве присутствуют.
Выявление сродства ткани к определённым стандартным опухолевым антителам свидетельствует о конкретном виде онкологического заболевания.

ТНРМЖ: методы определения экспрессии PD-L1

Тройной негативный рак молочной железы – самая агрессивная форма среди рака молочной железы . Традиционно применяемая химиотерапия не позволяла достичь значимого увеличения продолжительности жизни свыше медианы в 18 месяцев. Появление анти-PD-L1 терапии, с одной стороны, позволило преодолеть медиану общей выживаемости в 2 года, а с другой стороны – для назначения терапии необходимо выделить группу PD-L1 позитивных пациентов. В отличие от уротелиального рака, назначение анти-PD-L1 терапии обязательно требует тестирования пациенток с тройным негативным раком молочной железы.

Какой метод используется для определения экспрессии PD-L1 у пациентов с ТНРМЖ?

При определении статуса PD-L1 для решения вопроса об иммунотерапии важно выбрать оптимальный метод. Тест VENTANA PD-L1 (SP142) позволяет идентифицировать пациентов с тройным негативным раком молочной железы (ТНРМЖ), которые могут получать анти-PD-L1 терпию

Ткани пациентов с ТНРМЖ, окрашенные с использованием теста VENTANA PD-L1 (SP142), оценивают по окрашиванию инфильтрирующих опухоль иммунных клеток (IC). IC – это иммунные клетки, присутствующие в интратуморальной и прилегающей перитуморальной строме. В это понятие включены лимфоциты, макрофаги, дендритные клетки и полиморфноядерные лейкоциты. IC оценивают как долю области опухоли, которую занимают иммунные клетки с окрашиванием PD-L1 любой интенсивности.

Что нужно учитывать при выборе теста для оценки PD-L1 экспрессии?

Тест для определения экспрессии PD-L1 позволяет выделить группу пациентов с наибольшей вероятностью ответа на терапию ингибиторами иммунных контрольных точек

Важно учитывать, что для различных иммунных препаратов и показаний существуют отличия в методике проведения PD-L1 тестирования:

Отличается пороговый уровень PD-L1 экспрессии. Для одного препарата порог назначения – это 1% экспрессии PD-L1 и более, для другого – это уровень не менее 5%.

Отличается тип клеток, на которых оценивается PD-L1. Некоторые опухоли требуют исследования уровня PD-L1 на опухолевых клетках, другие – на иммунных.

Отличаются тест-системы для PD-L1. Так, для определения PD-L1 при тройном негативном раке молочной железы перед назначением анти-PD-L1 терапии проводится исследование PD-L1 c применением тест-системы Ventana SP142

Важно учитывать, что в случае изменения терапии может потребоваться другая тест-система – тест SP263 или 22С3.

Вывод – перед проведением PD-L1 исследования необходимо удостовериться, что выбран правильный тест, на правильной культуре клеток и корректно интерпретировать полученные результаты.

Роль PD-L1 в патогенезе злокачественных образований

Воздействие на сигнальный путь иммунной контрольной точки PD-1:PD-L1 лежит в основе иммунной терапии рака легкого, молочной железы, уротелиального рака и других злокачественных новообразований. Воздействие направлено на рецептор PD-1 и его лиганды PD-L1 и PD-L2. Наиболее важная роль в ускользании опухоли от иммунного ответа отводится взаимодействию рецептора PD-1 и лиганда PD-L1.

Длительная антигенная стимуляция, часто наблюдаемая при опухолевых заболеваниях, приводит к устойчивой экспрессии рецептора PD-1 на T-лимфоцитах и повышению экспрессии лигандов PD-L1 на опухолевых и иммунных клетках. Таким образом, опухоль вырабатывает механизм ускользания от иммунного ответа посредством гиперэкспрессии лиганда PD-L1, который, связываясь с рецептором PD-1 на T-лимфоцитах, нарушает их цитотоксическую активность (рис.2).

Рисунок 2. Сигнальный путь PD-1:PD-L1, инактивирующий действие Т-лимфоцитов.

Применение технологии в репродуктивной медицине

Иммуногистохимия в репродуктивной медицине применяется для диагностики причин бесплодия и оценки потенциальной эффективности ЭКО. Известно, что беременность при применении вспомогательных репродуктивных технологий наступает у 35–45 % пациенток после первой попытки. Около 30 % пациенток имеют многократные неудачи, причины которых различны, в том числе неблагоприятное состояние эндометрия.

Долгое время для изучения патологии эндометрия использовался гистологический метод исследования. Однако он не позволял достоверно оценить рецептивную способность эндометрия, что породило потребность в поиске более информативных методов диагностики. Одним из них стала иммуногистохимия, которую в настоящее время используют в следующих целях:

1. Исследование структурных особенностей эндометрия.
2. Определение способности эндометрия к имплантации.
3. Определение негативных факторов наступления беременности, например, гиперэкспрессии альфа-эстрогеновых рецепторов в железистых и стромальных клетках в среднелютеиновую фазу, снижение прогестерон+ стромальных клеток.
4. Определение благоприятных факторов наступления беременности — оптимальное соотношение прогестероновых и эстрогеновых рецепторов, количество эндометриальных эпителиоцитов с пиноподиями более 50 %.
5. Оценка восприимчивости эндометрия к гормонам. На основании полученной информации корректируют дозу гормональных препаратов, используемых на этапах планирования и проведения ЭКО.
6. Определение иммунокомпетентных клеток-киллеров, препятствующих наступлению беременности.

Экспертное мнение врача

Сараева О.В.
Акушер -гинеколог, репродуктолог. Гинеколог-эндокринолог. Врач высшей категории. Кандидат медицинских наук.

Иммуногистохимия представляет собой гораздо более информативный метод диагностики, чем классическая гистология. Методика позволяет с точностью определить состояние эндометрия и выявить причины бесплодия или множественных неудач ЭКО. Кроме того, она может использоваться в прогнозировании результатов экстракорпорального оплодотворения. Несмотря на относительную техническую сложность реализации, иммуногистохимические исследования получают все большее распространение в сфере репродуктивной медицины.

Виды

Выделяют два метода ИГХ-изучения – прямой и непрямой.

При прямом нужен один вид молекул-антител. Молекулы эти взаимодействуют с молекулой, которая является мишенью. Если эта патогенная частица присутствует в ткани и есть реакция, опухолевая ткань окрашивается.

Чаще применяют непрямой вид. Здесь необходимы две cellula. Первая начинает взаимодействовать с частицей атипичной, вторая вступает во взаимодействие с полученным комплексом «атипичная cellula – антитело». Маркер, который изменил свой цвет, связывают со второй частицей.

У непрямого ИГХ-изучения есть неоспоримое преимущество – чувствительность его более выше.

Еще одно преимущество в том, что для проведения диагностики по второму виду, нужно ограниченное количество молекулярного материала.

Описание

Иммуногистохимическое исследование пролиферативной активности по экспрессии Ki-67 (1 антитело) — исследование биоптата ткани, меченого антителами, под микроскопом. Анализ выполняется для определения активного роста опухоли.
ИГХ-исследования проводят после выполнения гистологического исследования.Иммуногистохимическое исследование  
Вид морфологического исследования тканей, полученных в ходе биопсии, и меченых специфическими антителами. В основе метода лежит принцип взаимодействия «антиген-антитело». Ткань, в которой происходит патологический процесс, экспрессирует антигены. При нанесении на образец ткани антител, образуется комплекс «антиген-антитело». Благодаря меткам, он становится доступным для визуализации. Врач-патоморфолог определяет в исследуемой ткани локализацию клеток, гормонов и их рецепторов, ферментов, иммуноглобулинов, компонентов клеток и отдельных генов.
Иммуногистохимическое исследование полученного материала включает определение наличия Ki-67 и в случае положительного ответа оценку его экспрессии.Ki-67 
Ki-67 — это маркёр пролиферативной активности опухоли. Антиген экспрессируется только во время деления клетки, в периоде её покоя маркёр отсутствует. Ki-67 является предсказывающим фактором — он определяет насколько агрессивен рост опухоли. Чем выше процент пролиферативной активности, тем с большей вероятностью опухоль ответит на химиотерапевтическое лечение. При низком уровне данного показателя опухоль в большей мере отреагирует на гормонотерапию.
Показатели процентной активности для каждой опухоли индивидуальные, они определяются локализацией патологического процесса.Показания к проведению ИГХ-исследования:

• рак любой локализации;
• подозрение на наличие опухолевого роста в организме;
• доброкачественные образования с целью исключения озлокачествления;
• опухоль молочной железы для оценки возможности лечения гормонами.

Подготовка
Материалом для исследования являются парафиновый блок и предметные стёкла. В случае если материалом является образец ткани в растворе формалина, дополнительно должна быть выполнена услуга изготовления стёкол.
При проведении гистологического исследования в сторонней лаборатории необходимо обязательно предоставить протокол гистологического исследования.Интерпретация результатов
Ответ выдается в виде описания микропрепарата, применяемых красителей и заключения. В заключении указывается индекс белка ki-67 в случае положительной реакции. Заключение может интерпретировать только врач, направивший на проведение исследования.

Как получают материал для гистологического исследования?

Образец ткани получают с помощью процедуры, которая называется биопсией. Она бывает разных видов:

• Эксцизионная — патологическое образование удаляют полностью. Такие операции одновременно являются и лечебными, и диагностическими.
• Инцизионная — удаляют часть патологического образования.
• Эндоскопическая — материал для исследования получают во время эндоскопических исследований полых органов, например, желудка, кишечника, мочевого пузыря, матки.
• Бритвенная — врач сбривает с помощью острого лезвия новообразование, возвышающееся над поверхностью кожи.
• Толстоигольная (трепан-биопсия) — получение столбика ткани с помощью трепана, специального инструмента в виде трубки с заостренным краем.
• Тонкоигольная аспирационная — с помощью иглы, соединенной со шприцем.
• Пайпель-биопсия — сбор образцов ткани из полости матки с помощью трубочки с боковым отверстием на конце, внутри которой находится поршень для создания отрицательного давления.
• Диагностическое выскабливание тела и шейки матки.
• Тонкоигольная эндоскопическая биопсия под контролем эндоУЗИ — получение материала с помощью иглы, введенной через стенку органа во время эндоскопического исследования.
• Мазки, отпечатки, соскобы.

Не все эти процедуры позволяют получить ткань органов с сохраненной структурой. Иногда для диагностики достаточно отдельных клеток — их изучение называется цитологическим исследованием. Врач выбирает подходящий вид биопсии, в зависимости от характера заболевания, размеров, локализации патологического образования и других факторов.

Перспективы

Перспективы, ИГХ, можно объединить в две группы:

• Обнаружение патологии;
• Лекарственная чувствительность.

Диагностические цели таковы:

• Окончательный вариант диагностического анализа;
• Уточнение степени раковой опухоли;
• Дифференцирование образований и процессов, с опухолями не связанными;
• Различение опухолевых процессов, присутствующих в организме.

Некоторые возможности с точки зрения препаратной чувствительности:

• Рецепторы стероидных гормонов;
• Белок Her2/neu;
• Рецепторы соматостатина 2А и 5 типов;
• PD-L1;
• Индекс пролиферативной активности (Ki-67);
• ALK, некоторые иные.

Суть

Иммуногистохимия (иначе ее называют иммуногистохимический анализ) представляет собой исследование, цель которого состоит в обнаружении патогенных клеток в тканевых образцах. Для этой цель используют молекулы, вырабатываемые иммунной системой.

Само название действия тройственное, в него уместились слова, которые сами по себе являются названиями определенных направлений в науке и практике:

• Иммунология;
• Гистология;
• Химия.

Реактивы, которые применяют, насыщены клетками (cellula), структура которых способна антигены к себе притягивать.

Для удобства, наглядности и контроля используют ферменты, начинающиеся проявляться при реакции положительной.

ИГХ – исследование дополнительное с точки зрения диагностики. К нему прибегают в случае отсутствия результатов гистологии, а также для уточнения на уровне молекул характеристик опухоли.

ИГХ имеет практическое применение при:

• Характеристике клеток;
• Анализе внутриклеточных процессов и уникальности синтеза, в клетках происходящего;
• Анализе гормонов и их рецепторов.

Как проводится иммуногистохимия

Для проведения исследования требуется фрагмент эндометрия, который получают во время проведения биопсии (раздельного диагностического выскабливания или пайпель-биопсии). Этот материал помещается в забуференный формалин и направляется в лабораторию, где проходит несколько этапов обработки:

1. Фиксация и проводка. Эти процедуры необходимы, чтобы сохранить структуру ткани максимально неповрежденной.
2. Изготовление парафиновых блоков. Подготовленный материал заливают парафином. С этого момента блок может храниться неограниченное количество времени, не теряя своих свойств. При необходимости, в любой момент из него могут быть приготовлены гистологические препараты.
3. Изготовление гистологических препаратов. Ткань нарезают с помощью микротома на тонкие пластинки, толщиной несколько микрометров (это в десятки раз меньше, чем толщина волоса), фиксируют на стекле и окрашивают красителями для гистологического и иммуногистохимического исследования.
4. На финальной стадии препараты оценивает врач-патоморфолог.

В заключении выдаются результаты как гистологического, так и иммуногистохимического исследования. На этом основании лечащий врач выбирает оптимальный метод лечения.

Как забеременеть в 35?

По рекомендациям ВОЗ оптимальным возрастом для беременности является промежуток от 20 до 30 лет, однако по разным причинам женщины могут планировать ее позже.

Лечение бесплодия у женщин

В наше время бесплодие является не только медицинской, но и социальной проблемой.

Повышенный уровень тестостерона у женщин

Тестостерон — один из главных мужских гормонов, однако в определенном количестве он вырабатывается яичниками и надпочечниками у женщин.

Стимуляция овуляции

Расшифровка результатов

По результатам гистологического исследования оцениваются размеры взятого материала, его цвет, свойства и концентрация, а также патологические изменения в тканях, их атипичного роста и так далее.

Недостаточное количество биоматериала или отсутствие в нем патологии может дать ложноположительный результат, поэтому необходимо соблюдать правила забора исследуемого образца.

Изучение результатов гистологии входит в обязанности патологоанатома или патоморфолога. Они изучают историю болезни пациента и на основе клинических данных составляют заключение. В случае однозначных итогов лабораторных тестов, специалисты ставят окончательный диагноз. Спорные случаи врачи обсуждают на консилиуме.

Диагноз устанавливается согласно нормам ВОЗ или министерства здравоохранения страны.

Длительность гистологического исследования обычно длится от 1 недели, если образец был взят из мягких тканей и около 2 недель, если это образец костных тканей.

Транспортировка биоматериала сопровождается записью в специальном журнале и производится в тщательно упакованной таре ответственным лицом для передачи лаборанту.

• Инфекционные исследования
• Общеклинические исследования

Описание

Иммуногистохимическое исследование (2 антитела p16+ p53) — исследование биоптата ткани, меченого антителами, под микроскопом. Иммуногистохимическое исследование (ИГХ) используется в диагностике различных патологических состояний, диагностике и дифференцировки опухолей, а также для прогноза течения заболевания и оценки эффективности лечения.ИГХ-исследования проводят после выполнения гистологического исследования.Иммуногистохимическое исследование  
Вид морфологического исследования тканей, полученных в ходе биопсии, и меченых специфическими антителами. В основе метода лежит принцип взаимодействия «антиген-антитело». Ткань, в которой происходит патологический процесс, присутствуют определенные  антигены. При нанесении на образец ткани специфических антител, образуется комплекс «антиген-антитело» и происходит окрашивание ткани. В результате ИГХ-исследования выдается заключение о наличии или отсутствии экспрессии патологических белков (антигенов) в ткани, что помогает лечащему врачу поставить клинический диагноз и спрогнозировать эффективность лечения.
Диффузная экспрессия экспрессия p16 свидетельствует о прогрессировании заболевания. Отсутствие или очаговая экспрессия p16 может служить дополнительным признаком благоприятного течения патологического процесса в тканях. 
Одним из основных регуляторов клеточного цикла является супрессорный белок р53. Гиперэкспрессия белка р53 обычно ассоциируется с высоким риском развития местных рецидивов (распространение за пределы капсулы опухоли и/или метастазы в регионарные лимфоузлы) онкологического процесса. Показания к проведению ИГХ-исследования
Необходимость проведения иммуногистохимического исследования опухоли определяется лечащим врачом.Подготовка
Материалом для исследования являются парафиновый блок и гистологические стёкла. Для ИГХ-исследования обязательно предоставляется протокол гистологического исследования.
В случае если материалом является образец ткани в растворе формалина, то предварительно проводится гистологическое исследование ткани (вид гистологического исследования определяется лечащим врачом).Интерпретация результатов
Ответ выдается в виде описания микропрепарата, применяемых красителей и заключения. Заключение может интерпретировать только врач, направивший на проведение исследования.

Описание

Иммуногистохимическое определение дифференцировки и гистогенеза опухоли — исследование биоптата ткани, меченого антителами, под микроскопом. Анализ выполняется для определения тканевого происхождения опухоли и степени дифференцировки. Чем выше степень дифференцировки, тем ниже уровень злокачественности.
ИГХ-исследования проводят после выполнения гистологического исследования.Иммуногистохимическое исследование
Вид морфологического исследования тканей, полученных в ходе биопсии, и меченых специфическими антителами. В основе метода лежит принцип взаимодействия «антиген-антитело». Ткань, в которой происходит патологический процесс, экспрессирует антигены. При нанесении на образец ткани антител, образуется комплекс «антиген-антитело». Благодаря меткам, он становится доступным для визуализации. Врач-патоморфолог изучает количество клеток, окрашенных маркёром. Он определяет в исследуемой ткани локализацию клеток, гормонов и их рецепторов, ферментов, иммуноглобулинов, компонентов клеток и отдельных генов.Гистогенез опухоли
Гистогенез опухоли — это тканевое происхождение опухоли. Выявление гистогенеза позволяет определить морфологию опухоли и подобрать лечение. Ведь от происхождения опухоли зависит её чувствительность к процедурам химической или лучевой терапии.
Гистогенез опухоли устанавливается посредством изучения морфологии клеток и их сравнения с различными этапами онтогенетического развития клеток органа и ткани, в которых развилась данная опухоль.Степень дифференцировки
Степень дифференцировки показывает насколько опухолевая клетка отличается от нормальной по строению и функциям. Клетки опухоли подразделяют на:

• дифференцированные, когда строение опухоли максимально приближено к структуре ткани-предшественника;
• малодифференцированные, сходство которых с исходной тканью стёрто;
• недифференцированные (анаплазия) — клетки, утратившие какое-либо сходство с нормальными (исходными).

Чем ниже степень дифференцировки, тем выше уровень злокачественности опухоли.
Дифференцированные новообразования, как правило, относят к доброкачественным.
В рамках исследования используется панель из 5 антител. При необходимости подбираются дополнительные антитела.Показания к проведению ИГХ-исследования:

• определение типа опухоли, стадии развития, злокачественности и агрессивности;
• выявления первичного очага рака в стадии метастазирования.

Подготовка
Материалом для исследования являются парафиновый блок и предметные стёкла. В случае если материалом является образец ткани в растворе формалина, дополнительно должна быть выполнена услуга изготовления стёкол.
При проведении гистологического исследования в сторонней лаборатории необходимо обязательно предоставить протокол гистологического исследования.Интерпретация результатов
Ответ выдается в виде описания микропрепарата, применяемых красителей и заключения. Заключение может интерпретировать только врач, направивший на проведение исследования.